改善极性代谢物的非靶向分析

非靶向液相色谱分析的迷人之处在于未知化合物的存在，例如在生物标志物研究中。色谱法面临的一个特殊挑战是找到灵敏度和覆盖广谱物质之间的平衡。因此，亲水液相色谱 (HILIC) 特别适合含有极性化合物的分析。它与质谱 (MS) 完美匹配，并具有非常好的色谱性能。通过这种组合，非靶向分析非常适合筛选人血浆中的极性代谢物。

本应用报告展示了使用生物惰性YMC Accura Triart Diol-HILIC色谱柱对人血浆中的极性代谢物进行非靶向筛选。生物惰性涂层不锈钢硬件对于实现内源异构体的最高灵敏度和色谱分辨率至关重要。

对于此分析，血浆中所含的蛋白质用乙腈 (3:1 v/v) 沉淀。倾析并干燥样品后，用乙腈/水(70/30)重新溶解至原始浓度。

由于基质复杂，固定相的预处理步骤可能是必要的。通过使用生物惰性 YMC Accura Triart Diol-HILIC，4 次运行后即可实现柱调节（见图 2）。此外，在调节后提供了优异的保留稳定性。

稳健的 YMC Triart Diol-HILIC 固定相与每次进样后的清洁步骤和最佳平衡步骤相结合，形成稳健可靠的 HILIC 方法。

图 3 显示了人血浆样品的非靶向筛选以及低浓度 < 5 ppm 的极性代谢物的选定色谱图。

开发的 HILIC 方法使用生物惰性 YMC Accura Triart Diol-HILIC 色谱柱，涵盖多种极性化合物，具有出色的峰容量（平均基线峰宽为 0.25 分钟）。此外，该方法还实现了亮氨酸和异亮氨酸以及不对称和对称二甲基精氨酸（分别为 ADMA 和 SDMA）等重要关键对的解析。加上同时具有高灵敏度，该方法可确保可靠地生成生物学假设。

摘自《今日色谱》